血涂片的制作与染色技术

制作血涂片并进行染色，是临床中血细胞形态学检验，白细胞分类计数等检验项目的前提。能否快速制备高质量的血涂片，将影响到后续工作的开展，血片制作不佳，甚至会影响血细胞的识别。

一、血涂片的推制

1.载玻片用酒精棉擦净，取盖玻片备用

载玻片的握持方法（左手持片）

资源描述：血涂片的推制：载玻片的左手持法。左手拇指和中指持载玻片。 文件来源：范开,董军主编.宠物临床显微检验及图谱,化工出版社

2.用吸管吸取少量抗凝全血，管口轻触载玻片右1/4，使载玻片蘸上半滴全血

血片制作2：滴加血样

资源描述：用塑料吸管吸取少量抗凝全血，管口轻触载玻片1/4处，使载玻片蘸上半滴全血。 文件来源：范开,董军主编.宠物临床显微检验及图谱,化工出版社

3.右手持盖玻片（拇指、中指夹持盖玻片，食指轻压盖玻片表面，将盖玻片平滑的一边压在载玻片血滴前方，向后拉盖玻片至血滴，待血滴扩散成线（夹角30°左右），匀速向前推片至载玻片尽头

血片制作3：盖玻片持法

资源描述：右手拇指、中指夹持盖玻片两缘，食指轻压玻片表面，将选好的盖玻片平滑边压在载玻片上血滴的前方，两玻片夹角30°左右；后拉盖玻片至接触血滴，待血滴扩散成线。 文件来源：范开,董军主编.宠物临床显微检验及图谱,化工出版社

血片制作4：推片

资源描述：右手拇指、食指在夹持盖玻片的同时，也夹持了载玻片的两条边，并以之为轨道前推盖玻片，直至载玻片的尽头。注意：对高黏度血液，应尽量减小玻片间的夹角。 文件来源：范开,董军主编.宠物临床显微检验及图谱,化工出版社

4.扇动推好的血片，使其迅速干燥，以防细胞皱缩变形，并尽快染色

血片制作5：推制好的未染色的干燥血片

资源描述：要取得好的血涂片，应注意：①推片时用力要均匀；②推片速度适中；③玻片间夹角应固定。 文件来源：范开,董军主编.宠物临床显微检验及图谱,化工出版社

二、血涂片的染色

染色方式有很多，一般根据目的不同选择不同的染色方式。你可能接触过以下这些染色方式：

• 在组织切片和病理切片中常用的HE染色
• 细菌学检验中使用的革兰氏染色和美蓝染色
• 为观察脂肪和脂肪组织的苏丹III染色
• 为观察网状纤维时用的银染
• 此外还有用于神经学研究的锇酸染色等

在宠物临床中，血涂片的染色要兼顾染色时间短、染色效果好，一般使用瑞氏染色，有时也用瑞氏-吉姆萨染色。

染色时，染液、染色时间、环境温度等对染色效果都会产生影响。实际操作时，需要灵活掌握。

高倍镜下推制和染色良好的血涂片

资源描述：高倍镜下推制和染色良好的血涂片（400×5）：红细胞呈灰红色，单层排布，细胞间稍有间隙，基本不相重叠和挤压。 文件来源：范开,董军主编.宠物临床显微检验及图谱,化工出版社

推片不良的血涂片：细胞叠加

资源描述：推片不良的血涂片（瑞氏染色），1000×5：血细胞叠加、堆积 文件来源：范开,董军主编.宠物临床显微检验及图谱,化工出版社

染色不良的血涂片：染料沉积

资源描述：染色不良的血涂片（瑞氏染色），1000×5：染料沉渣过多 文件来源：范开,董军主编.宠物临床显微检验及图谱,化工出版社