白细胞分类计数

白细胞分类计数(differential count of white blood cell , DC)是指利用染色的血液涂片计算血液中各类细胞的百分率。

外周血液中的白细胞主要有5种，即嗜中性白细胞、嗜酸性白细胞、嗜碱性白细胞、淋巴细胞、单核细胞，它们各有其特定的生理机能，在正常时这5种白细胞之间有一定的比例。但在病理情况下，白细胞总数的变化反映机体防御机能的一般状态，各种白细胞之间百分比的变化，则反映机体防御机能的特殊状态。

由于白细胞总数的增减并不一定表示各类白细胞平均增多或减少，常常仅限于某一种或两种白细胞数的变化，从而引起白细胞之间百分比的相对改变。因此，白细胞计数对疾病的诊断具有一般意义，而白细胞分类计数则具有具体意义，在分析临床意义时，必须把二者结合起来。

一、白细胞分类计数实验操作步骤

1.器材

载玻片、染色盆及支架、染色缸、洗瓶、显微镜、油镜、白细胞分类计数器、吸水纸等。

2.试剂

瑞氏染液：瑞氏染粉0.1g，甲醇60.0mL。

将染色粉置于研钵中，加少量甲醇研磨，使其溶解，将已溶解的染液倒入洁净的棕色玻璃瓶中，剩下未溶解的染料再加少量甲醇研磨，如此继续操作，直至全部染料溶解并用完甲醇为止。在室温中保存7d后即可应用。新配的染液偏碱性，放置后可呈酸性。保存时间愈久，染色能力愈佳。 

3.涂片方法

取无油脂的洁净载玻片数张，选择边缘光滑的载片作为推片（推片一端的两角应磨去，也可用血细胞计数板的盖片做为推片），用左手的拇指及中指夹持载玻片，右手持推片；先取检血一小滴，放于载玻片的右端，将推片倾斜30°~40°角，使其一端与载玻片接触并放于血滴之前，向后拉动推片，使与血滴接触，待血液扩散形成一条线之后，以均等的速度轻轻向前推动推片，则血液均匀地被涂于载玻片上而形成一薄膜。

良好的血片，血液应分布均匀，厚度适当。对光观察时呈霓红色，血膜应位于玻片的中央，两端留有空隙，以便注明畜别，编号及日期。 

4.染色方法

瑞氏染色法：是最常用的染色法之一。将自然干燥的血片用蜡笔于血膜两端各划一道横线，以防染液外溢。置血片于水平支架上，滴瑞氏染液于血片上，并计其滴数，直至将血膜浸盖为止，待染1~2min后，滴加等量缓冲液或蒸馏水，轻轻吹动，使之混匀，再染4~l0min，用蒸馏水冲洗、吸干、油镜观察。 

5.分类计数

先用低倍镜检视血片上白细胞的分布情况，一般是粒细胞、单核细胞及体积较大的细胞分布于血片的上、下缘及尾端，淋巴细胞多在血片的起始端。滴加显微镜油，转过油镜头进行分类计数。

计数时，为避免重复和遗漏，可用四区、三区或中央曲折计数法推移血片，记录每一区的各种白细胞数。每张血片最少计数100个白细胞，连续观察2~3张血片，求出各种白细胞的百分比。

记录时，可用白细胞分类计数器，也可事先设计一表格，用画“正”字的方法记录，以便于统计百分数。 

二、各种白细胞的形态特征

各种白细胞的形态特征主要表现在细胞核及细胞浆的特有性状上，并注意细胞的大小。

1.嗜中性粒细胞

白细胞中数量最多的一种。细胞呈圆球形，比红细胞大。胞质中有特殊的细微颗粒，被染成极淡的紫红色，镜下不明显。核紫色，一般呈分叶状（2~3叶），细胞愈老，分叶愈多。

犬嗜中性杆状核粒细胞

资源描述：犬嗜中性杆状核粒细胞，瑞氏染色，1000×5。属未成熟的嗜中性粒细胞。核微呈肾型，染色稍淡，或呈带状，两边平行。箭头所指为肾型核，为晚幼嗜中性粒细胞，比普通杆状核粒细胞更为幼稚，其胞浆着色基本同于正常中性粒细胞。注意与单核细胞区别。 文件来源：范开,董军主编.宠物临床显微检验及图谱,化工出版社

犬的嗜中性分叶核粒细胞

资源描述：犬嗜中性分叶核粒细胞，瑞氏染色，1000×5。为成熟的嗜中性粒细胞。细胞呈圆形，胞浆淡粉色，胞浆内有多量紫红色细小颗粒；核紫色，形状多样，常分成2~3叶，叶之间有细丝相连。 文件来源：范开,董军主编.宠物临床显微检验及图谱,化工出版社

2.嗜酸性粒细胞

数量较少。较嗜中性粒细胞大。胞质中有被酸性染料染成深红色的粗大颗粒，颗粒分布及大小均匀。核蓝紫色，一般分为两叶或呈肾形。

犬嗜酸性粒细胞与嗜中性杆状核粒细胞比较

资源描述：犬嗜酸性粒细胞与嗜中性杆状核粒细胞比较，瑞氏染色，1000×5。上：嗜中性杆状核粒细胞，下：嗜酸性粒细胞。 文件来源：范开,董军主编.宠物临床显微检验及图谱,化工出版社

犬嗜酸性粒细胞

资源描述：犬嗜酸性粒细胞，瑞氏染色，1000×5。大小、形态与嗜中性粒细胞近似，但胞浆内含有较粗大的嗜酸性颗粒，颗粒常呈灰红色。 文件来源：范开,董军主编.宠物临床显微检验及图谱,化工出版社

3.嗜碱性粒细胞

数量极少，不易找到，可观察示范片。此细胞大小与嗜酸性细胞类似。胞质中有大小不等、分布不均的颗粒，被碱性染料染成深蓝色。

犬嗜碱性粒细胞

资源描述：犬嗜碱性粒细胞，瑞氏染色，1000×5。大小、形态与嗜中性粒细胞近似，但胞浆内含有较粗大的深蓝黑色颗粒，核分叶不明显。为犬血液中含量最少的白细胞。罕见。 文件来源：范开,董军主编.宠物临床显微检验及图谱,化工出版社

4.淋巴细胞

数量多，有大、中、小之分，以小淋巴细胞数量最多。

（1）小淋巴细胞：稍大于红细胞；核大，常呈球形，染成蓝紫色；胞质少，染成天蓝色，核与胞质间常有一白色亮圈。

（2）中淋巴细胞：约两倍于红细胞。胞质较多。

（3）大淋巴细胞：正常血液中少见。与单核细胞有些相似。

犬的淋巴细胞

资源描述：犬淋巴细胞，瑞氏染色，1000×5。分大、小淋巴细胞两种，小淋巴细胞呈圆形，比嗜中性粒细胞稍小，核蓝紫色，圆形或肾型，胞浆少，蓝色。大淋巴细胞较中性粒细胞稍大，胞浆相对较多，天蓝色。淋巴细胞胞浆清澈透明。 文件来源：范开,董军主编.宠物临床显微检验及图谱,化工出版社

5.单核细胞

数量很少，是最大的血细胞，胞质较多，染成蓝灰色，有的细胞质中可见嗜天青颗粒。核呈马蹄形和不规则形，常位于细胞一侧，染色较淋巴细胞核浅，通常呈网状，有的可见核仁。

犬单核细胞

资源描述：犬单核细胞，瑞氏染色，1000×5。通常较其他血细胞大，核蓝紫色，但较淋巴细胞核色淡。核呈肾型、多角形等，形状不规则；胞浆较多，呈浅灰蓝色，有时内含大小不等的空泡和灰尘样颗粒。 文件来源：范开,董军主编.宠物临床显微检验及图谱,化工出版社

犬单核、淋巴与嗜中性杆状核粒细胞比较

资源描述：犬单核、淋巴与嗜中性杆状核粒细胞比较。瑞氏染色，1000×5。红色箭头所指为嗜中性粒细胞（最左侧位分叶核，其余为杆状核），绿色箭头所指为单核细胞，蓝色箭头所致为淋巴细胞。 文件来源：范开,董军主编.宠物临床显微检验及图谱,化工出版社

6.血小板

为形态不规则，染成淡蓝色的小体。常聚集成群，无核，中央有嗜碱性颗粒。 

三、正常值

四、白细胞分类计数变化的基本规律和临床意义

由于外周血液中的嗜中性白细胞、嗜酸白细胞、嗜碱白细胞、淋巴细胞和单核细胞等5种白细胞各有其生理功能，在不同病理情况下，可引起不同类型的白细胞发生数量和质量的变化。因此，在分析白细胞变化的意义时，应计算各种类型白细胞的绝对值，才有诊断参考价值。

某种类型白细胞的绝对值＝白细胞总数×该种白细胞分类计数的百分率。

1.嗜中性白细胞(neutrophil)

嗜中性白细胞是由骨髓中的多能干细胞（CFU-S）在集落刺激因子(colony stimulating factor , CSF)的刺激下，形成粒－单核细胞系祖细胞(CUF-GM)。CUF-GM在不同的调控因素作用下，向粒系或单核系细胞分化，并增殖和成熟为中性粒细胞（嗜中性白细胞）或单核细胞。

嗜中性粒细胞的发育阶段

资源描述：为便于解释白细胞在血液中增减变化的原因，一般人为地将白细胞的发育阶段分为几个池。红骨髓是白细胞的分裂成熟池，成熟的白细胞也可在红骨髓内贮存（贮存池）。 文件来源：网络

在正常的外周血液中的嗜中性白细胞主要是以细胞核分叶为2~3叶者居多，但可见到少量杆状核嗜中性白细胞。

嗜中性白细胞具有趋化作用、变形和黏附作用、吞噬和杀菌作用等功能，在机体防御和抵抗病原菌侵袭过程中起着重要作用。

白细胞数量可随动物生理状态而变化，一般下午较早晨的白细胞为高，采食、运动、恐惧、兴奋、高温或严寒都能使嗜中性白细胞增多，生理性增多都是一时性的，通常不伴有白细胞质量方面的变化。

（1）嗜中性白细胞增多

常见于感染性疾病（特别是各种病原微生物引起的全身性感染，如炭疽、腺疫、巴氏杆菌病、猪丹毒等传染病），一般炎症性疾病（如见于急性胃肠炎、肺炎、子宫内膜炎、急性肾炎、乳房炎等），化脓性疾病（如化脓性胸膜炎、化脓性腹膜炎、创伤性心包炎、肺脓肿、蜂窝织炎等），中毒性疾病（如酸中毒、某些植物中毒、尿毒症等），注射异种蛋白（如血清、疫等），外科手术等。

（2）嗜中性白细胞减少

主要是由于病原抑制了骨髓的功能，常见于传染病（如猪瘟、马传染性贫血、流行性感冒、传染性肝炎等），严重的败血症和化脓性疾病，中毒性疾病（如蕨中毒、砷中毒及驴的妊娠中毒等），血液疾病（如严重的贫血性疾病及再生障碍性贫血），某些物理（如放射线、放射性核素等）和化学因素（如氯霉素、铅等）破坏了骨髓的细胞成分。

在分析嗜中性白细胞增多和减少的变化时，要结合白细胞总数的变化及核象变化进行综合分析。

（3）嗜中性白细胞的核象变化

嗜中性白细胞的核象变化是指其细胞核的分叶状态，它反映白细胞的成熟程度，而核象变化又可反映某些疾病的病情和预后。

正常时，外周血液中嗜中性白细胞的分叶是以2~3叶为多，同时也可见到少量杆状核嗜中性白细胞。如果外周血液种未成熟的嗜中性白细胞增多，即嗜中性幼年核和杆状核白细胞的比例升高，称为核左移(shift to left)。如果分叶核嗜中性白细胞大量增加，核的分叶数目增多（4~5个或更多），则称为核右移(shift of right)。

犬嗜中性杆状核粒细胞

资源描述：犬嗜中性杆状核粒细胞，瑞氏染色，1000×5。属未成熟的嗜中性粒细胞。核微呈肾型，染色稍淡，或呈带状，两边平行。箭头所指为肾型核，为晚幼嗜中性粒细胞，比普通杆状核粒细胞更为幼稚，其胞浆着色基本同于正常中性粒细胞。注意与单核细胞区别。 文件来源：范开,董军主编.宠物临床显微检验及图谱,化工出版社

猫嗜中性分叶核粒细胞

资源描述：猫嗜中性分叶核粒细胞，瑞氏染色，1000×5。胞浆呈淡红色，有极其微小不易看清的颗粒。 文件来源：范开,董军主编.宠物临床显微检验及图谱,化工出版社

①嗜中性白细胞核左移

• 当杆状核嗜中性白细胞超过其正常参考值的上限时，称轻度核左移；
• 如果超过其正常参考值上限的1.5倍，并伴有少数晚幼嗜中性白细胞时，称中度核左移；
• 当其超过白细胞比值25%，并伴有更幼稚的嗜中性白细胞时，称重度核左移。

嗜中性白细胞核左移时，还常伴有程度不同的中毒性改变。

核左移伴有白细胞总数增高，称为再生性核左移。它表示骨髓造血机能加强，机体处于积极放于阶段，常见于感染、急性中毒、急性失血和急性溶血。

核左移而白细胞总数不高，甚至减少者，称退行性核左移。它表示骨髓造血机能减退，机体的抗病力降低，见于严重的感染、败血症等．

在兽医临床上，核左移的程度和白细胞总数的变化可作为评价动物病情的严重程度和机体的防御能力的指标。

• 当白细胞总数和嗜中性白细胞百分率略微增高，轻度核左移，表示感染程度轻，机体抵抗力较强；
• 如果白细胞总数和嗜中性白细胞百分率均增高，中度核左移及中毒性改变，表示有严重感染：
• 而当白细胞总数和嗜中性白细胞百分率明显增高，或白细胞总数并不增高甚至减少，但有显著核左移及中毒性改变，则表示病情极为严重。

②嗜中性白细胞核右移

核右移是由于缺乏造血物质使脱氧核糖核酸合成障碍所致。如在疾病期间出现核右移，则反映病情危重或机体高度衰弱，预后往往不良。见于重度贫血、重度感染和应用抗代谢药物治疗后。

（4）嗜中性白细胞的形态异常

在各种有害因素的作用下，嗜中性白细胞常有下列中毒性形态学改变：

①细胞大小不均

血片中嗜中性白细胞大小悬殊，见于慢性感染和病程较长的化脓性炎症。

②中毒性颗粒

在嗜中性白细胞的细胞浆中出现分布不均、大小不等的深紫色或蓝黑色粗大颗粒，这种颗粒称中毒性颗粒，见于烧伤和严重的化脓性感染。

③空泡

在嗜中性白细胞的细胞浆中出现1至数个大小不等的空泡，严重者细胞呈筛状，有时在细胞核上也能见到空泡，见于败血症和某些中毒性疾病（如棘豆属植物中毒、化学品中毒等）。

④核变性

血片中的嗜中性白细胞的细胞核发生固缩或溶解、碎裂。细胞核发生固缩时，核染色质呈深紫色粗大凝块状；细胞核溶解时，核膜破碎，核染色质松散、模糊、着色浅淡。这说明细胞受损程度加重，见于严重感染。

2.嗜酸性白细胞(eosinophil)

嗜酸性白细胞由骨髓干细胞产生。它具有吞噬作用，可吞噬带有抗体的红细胞、抗原复合物、细菌等。对组胺、免疫复合物和来自寄生虫、某些细菌的嗜酸性白细胞趋化因子等多种物质有趋化性，并分泌组胺酶灭活组胺，减轻某些过敏反应。

因此，嗜酸性白细胞对皮肤病、变态反应性疾病和寄生虫病的反应比较敏感。

兔嗜碱性、嗜酸性、嗜中性粒细胞

资源描述：兔嗜碱性、嗜酸性与嗜中性粒细胞，瑞氏染色，1000×5。兔的嗜中性粒细胞与嗜酸性粒细胞胞浆颗粒着色均鲜红，较难区分，区别主要在嗜酸性粒细胞胞浆颗粒较粗大。左：嗜碱性粒细胞；中：嗜酸性粒细胞；右：嗜中性粒细胞。 文件来源：范开,董军主编.宠物临床显微检验及图谱,化工出版社

猫嗜酸性粒细胞

资源描述：猫嗜酸性粒细胞，瑞氏染色，1000×5。胞浆内嗜酸性颗粒粗细程度中等，颜色常较鲜明。 文件来源：范开,董军主编.宠物临床显微检验及图谱,化工出版社

犬单核细胞与嗜酸性粒细胞的比较

资源描述：犬单核细胞与嗜酸性粒细胞比较，瑞氏染色，1000×5。上：嗜酸性粒细胞，下：单核细胞。单核细胞更大，胞浆内无颗粒（有空炮），胞浆丰富，核大呈扭曲的S形。嗜酸性粒细胞胞浆内有粗大的颗粒。 文件来源：范开,董军主编.宠物临床显微检验及图谱,化工出版社

（1）嗜酸性白细胞增多

见于肝片吸虫、球虫、旋毛虫、丝虫、钩虫、蛔虫、疥癣等寄生虫病；还见于荨麻疹、饲草过敏、血清过敏、药物过敏、湿疹及皮肤炎等。

（2）嗜酸性白细胞减少

见于感染性疾病和严重发热性疾病的初期及尿毒症、毒血症、严重创伤、中毒、过劳等。如嗜酸性白细胞持续下降，甚至完全消失，则表明病情严重。 

3.嗜碱性白细胞(basophil)

嗜碱性白细胞由骨髓干细胞产生，它在外周血液中仅占白细胞分类的0%~1%。其生理功能中突出的特点是参与超敏反应。

嗜碱性白细胞表面有IgE的Fc受体，当与IgE结合后即被致敏，再受相应抗原攻击时即引起颗粒释放反应。嗜碱性颗粒中含组胺、肝素、慢反应物质、血小板活化因子和嗜酸性白细胞趋化因子等多种活性物质。

兔嗜碱性、嗜酸性、嗜中性粒细胞

资源描述：兔嗜碱性、嗜酸性与嗜中性粒细胞，瑞氏染色，1000×5。兔的嗜中性粒细胞与嗜酸性粒细胞胞浆颗粒着色均鲜红，较难区分，区别主要在嗜酸性粒细胞胞浆颗粒较粗大。左：嗜碱性粒细胞；中：嗜酸性粒细胞；右：嗜中性粒细胞。 文件来源：范开,董军主编.宠物临床显微检验及图谱,化工出版社

犬嗜碱性粒细胞

资源描述：犬嗜碱性粒细胞，瑞氏染色，1000×5。大小、形态与嗜中性粒细胞近似，但胞浆内含有较粗大的深蓝黑色颗粒，核分叶不明显。为犬血液中含量最少的白细胞。罕见。 文件来源：范开,董军主编.宠物临床显微检验及图谱,化工出版社

嗜碱性白细胞增多见于慢性溶血、慢性恶性丝虫病、高血脂症等。由于嗜碱性白细胞在外周血液中很少见到，故其减少无临床意义。 

4.淋巴细胞(lymphocyte)

淋巴细胞来源于骨髓造血干细胞。淋巴细胞具有与抗原起特异性反应的能力，是重要的免疫活性细胞。淋巴细胞因发育和成熟途径不同，而分为T淋巴细胞和B淋巴细胞，它们之间又有效应细胞和记忆细胞之分。此外，还有非T非B淋巴细胞，即K细胞和NK细胞（自然杀伤细胞）。

犬异形淋巴细胞_钱串样红细胞

资源描述：犬钱串样红细胞、异形淋巴细胞。1200×。视野中心为一个异形淋巴细胞。该淋巴细胞大于嗜中性粒细胞，细胞核裂开不规则，具有网状染色质。 文件来源：高得仪,韩博等编著,宠物疾病实验室检验与诊断彩色图谱

猫淋巴细胞和嗜中性分叶核粒细胞的比较

资源描述：猫嗜中性分叶核粒细胞与淋巴细胞，瑞氏染色，1000×5。左：嗜中性分叶核粒细胞；右：淋巴细胞。 文件来源：范开,董军主编.宠物临床显微检验及图谱,化工出版社

猫淋巴细胞

资源描述：猫淋巴细胞，瑞氏染色，1000×5。细胞核大，椭圆形，胞浆少，染色偏蓝色。 文件来源：范开,董军主编.宠物临床显微检验及图谱,化工出版社

犬的淋巴细胞

资源描述：犬淋巴细胞，瑞氏染色，1000×5。分大、小淋巴细胞两种，小淋巴细胞呈圆形，比嗜中性粒细胞稍小，核蓝紫色，圆形或肾型，胞浆少，蓝色。大淋巴细胞较中性粒细胞稍大，胞浆相对较多，天蓝色。淋巴细胞胞浆清澈透明。 文件来源：范开,董军主编.宠物临床显微检验及图谱,化工出版社

T淋巴细胞占血液淋巴细胞的50%~70%，可存活数月至数年，它主要参与淋巴组织的再循环活动，具有加强免疫反应、散布记忆细胞、充实淋巴组织，并使进入体内的抗原与抗原反应细胞广泛接触等作用；

B淋巴细胞占血液中淋巴细胞的15%~30%，寿命短，仅存活4~5d，B淋巴细胞经抗原激活后转化为浆细胞，产生特异的抗体，在体液免疫中发挥着重要的作用。血液中淋巴细胞和嗜中性白细胞在百分比中大致成反比。

（1）淋巴细胞增多

常见于感染性疾病（如结核、鼻疽、布氏杆菌病等慢性传染病和猪瘟、流行性感冒、犬瘟热、犬病毒性肠炎、马传染性贫血等病毒性疾病及血液原虫病），急性传染病的恢复期及淋巴性白血病等。另外，当嗜中性白细胞减少，骨髓造血功能减退时，淋巴细胞相对增多。  

（2）淋巴细胞减少

见于嗜中性白细胞绝对值增多时的各种疾病，如炭疽、巴氏杆菌病、急性胃肠炎、化脓性胸膜炎等。还见于淋巴组织受到破坏（如淋巴肉瘤、结核病、流行性淋巴管炎等），应用肾上腺皮质激素、免疫抑制药物和放射线治疗等。 

5.单核细胞(monocyte)

单核细胞由粒单核细胞系祖细胞(CFU-GM)分化，经原单核、幼单核阶段发育为成熟的单核细胞而进入血液。单核细胞在血液中仅逗留1~3d即逸出血管进入组织或体腔内，转变为巨噬细胞，形成单核—巨噬细胞系统，其功能才完全趋于成熟。

其功能主要是激活淋巴细胞，使淋巴细胞在特异性免疫中起着重要的作用；吞噬和杀灭某些病原体，如病毒、结核杆菌、布氏杆菌等；吞噬衰老的红细胞和清除损伤组织及死亡的细胞：抑制肿瘤细胞的生长：在嗜中性白细胞和单核细胞生长中起到反馈调节作用。

猫单核细胞

资源描述：猫单核细胞，瑞氏染色，1000×5。细胞体积很大，核大，呈肾性或不规则，胞浆丰富。 文件来源：范开,董军主编.宠物临床显微检验及图谱,化工出版社

犬单核、淋巴与嗜中性杆状核粒细胞比较

资源描述：犬单核、淋巴与嗜中性杆状核粒细胞比较。瑞氏染色，1000×5。红色箭头所指为嗜中性粒细胞（最左侧位分叶核，其余为杆状核），绿色箭头所指为单核细胞，蓝色箭头所致为淋巴细胞。 文件来源：范开,董军主编.宠物临床显微检验及图谱,化工出版社

犬单核细胞与嗜酸性粒细胞的比较

资源描述：犬单核细胞与嗜酸性粒细胞比较，瑞氏染色，1000×5。上：嗜酸性粒细胞，下：单核细胞。单核细胞更大，胞浆内无颗粒（有空炮），胞浆丰富，核大呈扭曲的S形。嗜酸性粒细胞胞浆内有粗大的颗粒。 文件来源：范开,董军主编.宠物临床显微检验及图谱,化工出版社

（1）单核细胞增多

见于慢性感染性疾病（如结核、布氏杆菌病等及某些霉菌辱染和大多数伴有肉芽肿性反应的疾病），原虫病（如巴贝斯虫病、锥虫病及弓形虫等）。还见于疾病的恢复期及使用促肾上腺皮质激素、糖皮质类激素等药物。

（2）单核细胞减少

见于急性传染病的初期及各种疾病的垂危期。